引物合成采用化学合成固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。
短链引物:6-15 nt
常规引物:16-59 nt
长链引物:60-120 nt
| 纯化方式 | 5~20 nt | 21~40 nt | 41~60 nt | 61~90 nt | 91~120nt | 应用 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| OPC纯化 | 适用 | 推荐 | 推荐 | 适用 | 不适用 | PCR扩增、亚克隆、点突变、全基因合成及DNA测序等。 |
| PAGE纯化 | 不适用 | 适用 | 适用 | 推荐 | 推荐 | 对40 nt以上的普通引物的纯化,用于定点突变、克隆、蛋白结合凝胶迁移电泳分析等。 |
| HPLC纯化 | 推荐 | 推荐 | 适用 | 不适用 | 不适用 | 小于50 nt的普通引物的纯化,上述应用及修饰引物的纯化;商业化的诊断引物或探针等。 |
我们可以合成所有常见的修饰引物。我们合成的修饰引物全部采用HPLC纯化,确保引物序列准确性和更好的纯度。修饰引物的HPLC纯化不收取纯化费用。 修饰引物的价格=普通DNA 合成价格+修饰价格。
| 类别 | 修饰/标记 | 备注 |
|---|---|---|
| 稀有碱基 | dI(bp) | |
| dU(bp) | ||
| 5'修饰 | 5'SH-(CH2)6 | 巯基 |
| 5'Amino Linker C6 | 氨基 | |
| 5'Phosphorylation | 磷酸化 | |
| 5'Biotin | 生物素 | |
| 5'Digoxin | 地高辛 | |
| 5'FAM | ||
| 5'HEX | ||
| 5'TET | ||
| 5'TAMRA | ||
| 5'ROX | ||
| 5'Cy3 | ||
| 5'Cy5 | ||
| 5'VIC | ||
| 5'Dabcyl | ||
| 3'修饰 | 3'Amino Linker C7 | 氨基 |
| 3'Phosphorylation | 磷酸化 | |
| 3'Biotin | 生物素 | |
| 3'Digoxin | 地高辛 | |
| 3'FAM | ||
| 3'TAMRA | ||
| 3'ROX | ||
| 3'Cy3 | ||
| 3'Cy5 | ||
| 3'Dabcyl | ||
| 3'BHQ-1 | ||
| 3'BHQ-2 | ||
| 3'eclipse | ||
| 3'MGB | ||
| 其他修饰 | LNA(bp) | 锁核酸 |
| 硫代(bp) | 硫代修饰 | |
| Spacer C3(bp) | 间臂(Spacer) | |
| Spacer 9(bp) | ||
| Spacer 12(bp) | ||
| Spacer C12(bp) | ||
| Spacer 18(bp) | ||
| dT-C6-Amino | 氨基 |
| 类别 | 探针类型 | 修饰/标记 |
|---|---|---|
| 双标记修饰 | MGB探针 | 5'FAM and 3'MGB |
| 5'Rox and 3'MGB | ||
| 5'HEX and 3'MGB | ||
| 5'VIC and 3'MGB | ||
| BHQ1探针 | 5'FAM and 3'BHQ-1 | |
| 5'HEX and 3'BHQ-1 | ||
| 5'TET and 3'BHQ-1 | ||
| 5'VIC and 3'BHQ-1 | ||
| BHQ2探针 | 5'FAM and 3'BHQ-2 | |
| 5'ROX and 3'BHQ-2 | ||
| 5'Cy5 and 3'BHQ-2 | ||
| 5'TAMRA and 3'BHQ-2 | ||
| BHQ3探针 | 5'Cy5 and 3'BHQ-3 | |
| TAMRA探针 | 5'FAM and 3'TAMRA | |
| 5'HEX and 3'TAMRA | ||
| 5'TET and 3'TAMRA | ||
| 5'VIC and 3'TAMRA | ||
| Dabcyl(分子信标) | 5'FAM and 3'Dabcyl | |
| 5'CY5 and 3'Dabcyl | ||
| 5'HEX and 3'Dabcyl | ||
| 5'VIC and 3'Dabcyl | ||
| Eclipse探针 | 5'FAM and 3'Eclipse | |
| 5'ROX and 3'Eclipse | ||
| 5'HEX and 3'Eclipse | ||
| 5'TAMRA and 3'Eclipse | ||
| 5'CY3 and 3'Eclipse | ||
| 5'CY5 and 3'Eclipse |